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本生解析競(jìng)爭(zhēng)法在ELISA中的兩種計(jì)算方法
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA的兩種主要計(jì)算方法如下,結(jié)合實(shí)驗(yàn)規(guī)范與數(shù)據(jù)分析要點(diǎn):
一、陽(yáng)性判定值法?
計(jì)算步驟?
先計(jì)算陰性對(duì)照(NCX)和陽(yáng)性對(duì)照(PCX)的平均吸光度(A值),要求(NCX-PCX)差值≥0.300(如抗HBc檢測(cè)試劑盒)?。
陰性對(duì)照A值需滿足:≥0.5×NCX且≤1.5×NCX,超出范圍需剔除或重測(cè)?。
陽(yáng)性判定值公式:
判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
若樣本A值≤判定值,判為陽(yáng)性;反之陰性?。
適用場(chǎng)景?
需嚴(yán)格驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性(如抗HBc檢測(cè))?。
二、抑制率法?
計(jì)算步驟?
抑制率公式:抑制率(%)= 陰性對(duì)照A值?樣本A值
陰性對(duì)照A值?樣本A值 ×100%
通常以抑制率≥50%為陽(yáng)性,<50%為陰性?。
優(yōu)勢(shì)與局限?
適用于小分子抗原(如激素、藥物)的快速篩查?。
需確保陰性對(duì)照A值在1.0-1.5之間以保證靈敏度?。
三、方法對(duì)比?
方法? ?適用對(duì)象? ?關(guān)鍵指標(biāo)?
陽(yáng)性判定值法 抗體/大分子抗原 需驗(yàn)證(NCX-PCX)差值有效性
抑制率法 小分子抗原(如藥物) 抑制率≥50%為陽(yáng)性
注:實(shí)驗(yàn)前需校準(zhǔn)儀器,并設(shè)置空白對(duì)照(Blank)和最大結(jié)合對(duì)照(B0)以排除干擾?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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